BD流式細胞儀的檢測範圍和應用領域

1.流式細胞儀(yi) 可以檢測細胞結構，包括：細胞大小、細胞粒度、細胞表麵麵積、核漿比例、DNA含量與(yu) 細胞周期、R NA 含量、蛋白質含量。

2.流式細胞儀(yi) 可以檢測細胞功能，包括：細胞表麵/ 胞漿/ 核的特異性抗原、細胞活性、細胞內(nei) 細胞因子、酶活性、激素結合位點和細胞受體(ti) 。

二、BD流式細胞儀(yi) 的臨(lin) 床應用

1.流式細胞術在腫瘤學中的應用：流式細胞術可以檢測腫瘤細胞增殖周期、檢測腫瘤細胞表麵標記、癌基因表達產(chan) 物、進行多藥耐藥性分析、檢測凋亡;2.流式細胞術在血液學中的應用：檢測白血病和淋巴瘤細胞、活化血小板、造血幹細胞(CD34+)計數、白血病與(yu) 淋巴瘤的免疫分型、網織紅細胞計數、細胞移植的交叉配型和免疫狀態監測;3.流式細胞術在免疫學中的應用：可以進行淋巴細胞及其亞(ya) 群分析、淋巴細胞免疫分型、檢測細胞因子。

三、BD流式細胞儀(yi) 的科研應用

主要有細胞動力學功能研究、環境微生物分析、流式細胞術與(yu) 分子生物學研究。

四、流式細胞術常規檢測時的樣品製備

(一) 直接免疫熒光標記法

取一定量細胞(約1 × 106 細胞/ml )，直接加入連接有熒光素的抗體(ti) 進行免疫標記反應(如做雙標或多標染色，可把幾種標記有不同熒光素的抗體(ti) 同時加入)，孵育20-60分鍾後，用PBS(pH7.2 - 7.4)洗1-2 次，加入緩衝(chong) 液重懸，上機檢測。本方法操作簡便，結果準確，易於(yu) 分析，適用於(yu) 同一細胞群多參數同時測定。雖然直標抗體(ti) 試劑成本較高，但減少了間接標記法中較強的非特異熒光的幹擾，因此更適用於(yu) 臨(lin) 床標本的檢測。

(二) 間接免疫熒光標記法

取一定量的細胞懸液(約1X106 細胞/ml )，先加入特異的*抗體(ti) ，待反應*後洗去未結合抗體(ti) ，再加入熒光標記的第二抗體(ti) ，生成抗原-抗體(ti) -抗抗體(ti) 複合物，以FCM檢測其上標記的熒光素被激發後發出的熒光。本方法費用較低，二抗應用廣泛，多用於(yu) 科研標本的檢測。但由於(yu) 二抗一般為(wei) 多克隆抗體(ti) ，特異性較差，非特異性熒光背景較強，易影響實驗結果。所以標本製備時應加入陰性或陽性對照。

另外，由於(yu) 間標法步驟較多，增加了細胞的丟(diu) 失，不適用測定細胞數較少的標本。