對FACSAria流式細胞儀(yi) 96孔微孔板單個(ge) 細胞分選方法進行優(you) 化和應用。通過對液流的調節.獲得較穩定的分選設定值;在96孔微孔板蓋上分選肉眼可見液滴,確定分選液滴在96孔微孔板每孔相對應的蓋上的位置;分選結束後,計數單個(ge) 細胞存在的細胞孔數;分選細胞培養(yang) 7d後.記錄單個(ge) 細胞存在孔數及單克隆形成的數量。結果5個(ge) 細胞形成的液滴即肉眼清晰可見;96微孔板有單個(ge) 細胞的孔數為(wei) 80~90個(ge) ,單個(ge) 細胞獲得率為(wei) 83.3%~93.7%,培養(yang) 7d後,有活細胞存在的孔數為(wei) 5~38孔,即單克隆形成率為(wei) 6.3%~42.2%。分選前在96孔微孔板板蓋上分選肉眼可見液滴的簡單方法使得對液流位置的判斷直觀可見:流式細胞儀(yi) 96孔微孔板單細胞分選是一種簡單易行,準確有效地獲得單個(ge) 細胞和單克隆的方法。
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