蛋白純化注意事項

1.  選擇表達載體(ti) 時，要根據所表達蛋白的最終應用考慮。如為(wei) 方便純化，可選擇融合表達；如為(wei) 獲得天然蛋白，可選擇非融合表達。

 

2.  融合表達時在選擇外源DNA同載體(ti) 分子連接反應時，對轉錄和轉譯過程中密碼結構的閱讀不能發生幹擾。

3.  菌液OD值要小於(yu) 1，否則細胞太濃太老，不易破碎，且質粒易丟(diu) 失。

4.  誘導時間最好做一個(ge) 梯度，不同蛋白誘導時間需摸索。

5.  誘導溫度適當摸索：25、30℃。

6.  IPTG濃度：一般在1 mM 以內(nei) ，可適當摸索。

7.  超聲條件可視實際情況改變，隻要使菌體(ti) 裂解充分即可，即菌液清亮不粘稠。