淺析BD 流式細胞儀的工作原理

　　BD 流式細胞儀(yi) 的工作原理是：將待測細胞經特異性熒光染料染色後放入樣品管中，在氣體(ti) 的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出，形成細胞柱。
 

　　BD 流式細胞儀(yi) 通常以激光作為(wei) 發光源。經過聚焦整形後的光束，垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細胞在激光束的照射下，產(chan) 生散射光和激發熒光。
 

　　這兩(liang) 種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收。光散射信號在前向小角度進行檢測，這種信號基本上反映了細胞體(ti) 積的大小;熒光信號的接受方向與(yu) 激光束垂直，經過一係列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個(ge) 不同波長的熒光信號。
 

　　這些熒光信號的強度代表了所測細胞膜表麵抗原的強度或其核內(nei) 物質的濃度，經光電倍增管接收後可轉換為(wei) 電信號，再通過模/數轉換器，將連續的電信號轉換為(wei) 可被計算機識別的數字信號。
 

　　計算機把所測量到的各種信號進行計算機處理，將分析結果顯示在計算機屏幕上，也可以打印出來，還可以數據文件的形式存儲(chu) 在硬盤上以備日後的查詢或進一步分析。
 

　　檢測數據的顯示視測量參數的不同由多種形式可供選擇。單參數數據以直方圖的形式表達，其X軸為(wei) 測量強度，Y軸為(wei) 細胞數目。
 

　　一般來說，BD 流式細胞儀(yi) 坐標軸的分辨率有512或1024通道數，這視其模數轉換器的分辨率而定。對於(yu) 雙參數或多參數數據，既可以單獨顯示每個(ge) 參數的直方圖，也可以選擇二維的三點圖、等高線圖、灰度圖或三維立體(ti) 視圖。
 

　　細胞的分選是通過分離含有單細胞的液滴而實現的。在流動室的噴口上配有一個(ge) 超高頻電晶體(ti) ，充電後振動，使噴出的液流斷裂為(wei) 均勻的液滴，待測定細胞就分散在這些液滴之中。
 

　　將這些液滴充以正負不同的電荷，當液滴流經帶有幾千伏特的偏轉板時，在高壓電場的作用下偏轉，落入各自的收集容器中，不予充電的液滴落入中間的廢液容器，從(cong) 而實現細胞的分離。對分選出的細胞可以進行培養(yang) 或其它處理，做更深的研究。