定量PCR儀(yi) 主要由兩(liang) 部分組成,一個(ge) 是PCR係統,一個(ge) 是熒光檢測係統。選擇定量PCR儀(yi) 的關(guan) 鍵——由於(yu) 定量PCR必需借助樣本和標準品之間的對比來實現定量的,對於(yu) 定量PCR係統來說,重要的參數除了傳(chuan) 統PCR的溫控精確性、升降溫速度等等,更重要的還在於(yu) 樣品孔之間的均一性,以避免微小的差別被指數級放大。
至於(yu) 熒光檢測係統,多色多通道檢測是當今的主流趨勢——儀(yi) 器的激發通道越多,儀(yi) 器適用的熒光素種類越多,儀(yi) 器適用範圍就越寬;多通道指可同時檢測一個(ge) 樣品中的多種熒光,儀(yi) 器就可以同時檢測單管內(nei) 多模版或者內(nei) 標樣品,通道越多,儀(yi) 器適用範圍越寬、性能就更強大。熒光檢測係統主要包括激發光源和檢測器。激發光源有鹵鎢燈光源、氬離子激光器、發光二極管LED光源,前者可配多色濾光鏡實現不同激發波長,而單色發光二極管LED價(jia) 格低、能耗少、壽命長,不過因為(wei) 是單色,需要不同的LED才能更好地實現不同激發波長。監測係統有超低溫CCD成像係統和PMT光電倍增管,前者可以一次對多點成像,後者靈敏度高但一次隻能掃描一個(ge) 樣品,需要通過逐個(ge) 掃描實現多樣品檢測,對於(yu) 大量樣品來說需要較長的時間。
定量PCR儀(yi) 需要考慮的另外一個(ge) 因素是軟件設計,這一點目前較新型號的儀(yi) 器都有不錯的配套軟件可以滿足常規使用。
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