二氧化碳培養箱的無汙染技術

       二氧化碳培養(yang) 箱是通過在培養(yang) 箱箱體(ti) 內(nei) 模擬形成一個(ge) 類似細胞/組織在生物體(ti) 內(nei) 的生長環境，如穩定的溫度（37°C）、穩定的CO2水平（5%）、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）、較高的相對飽和濕度（95%），來對細胞/組織進行體(ti) 外培養(yang) 的一種裝置。

廣泛應用於(yu) 細胞、組織培養(yang) 和某些特殊微生物的培養(yang) ，常見於(yu) 細胞動力學研究、哺乳動物細胞分泌物的收集、各種物理、化學因素的致癌或毒理效應、抗原的研究和生產(chan) 、培養(yang) 雜交瘤細胞生產(chan) 抗體(ti) 、體(ti) 外授精（IVF）、幹細胞、組織工程、藥物篩選等研究領域。在生物活體(ti) 內(nei) ，生物體(ti) 有自身的免疫係統保護細胞或組織，但是在體(ti) 外培養(yang) 時，沒有任何保護自己的免疫屏障。

對於(yu) 二氧化碳培養(yang) 箱的基本參數溫度、CO2和濕度，大多數培養(yang) 箱都能滿足研究實驗的需要。然而，針對培養(yang) 過程中麵臨(lin) 的各種汙染源，各品牌二氧培養(yang) 箱的控製方式和效果不盡相同，因此細胞體(ti) 外培養(yang) 中zui大的威脅實際上是汙染問題。二氧化碳培養(yang) 箱中的主要汙染源：細菌、真菌（黴菌和酵母菌）、病毒、支原體(ti) 以及非同種細胞對於(yu) 細胞來說，非常理想的培養(yang) 環境同樣也適合這些汙染源的生存，培養(yang) 箱本身是不會(hui) 辨別的，而細胞培養(yang) 中大部分時間裏細胞都是被放置於(yu) 培養(yang) 箱內(nei) ，因此箱體(ti) 內(nei) 能否抑菌或滅菌非常關(guan) 鍵！

細菌：細菌汙染後，培養(yang) 基1-2天就會(hui) 渾濁變黃，對細胞生長影響明顯，應迅速將汙染細胞與(yu) 其它細胞係隔離，滅菌後丟(diu) 棄，還要用實驗室消毒劑消毒培養(yang) 器皿和超淨台。病毒：由於(yu) 病毒寄生生存，爆發後盡快和正常細胞隔離，丟(diu) 棄處理，相對來說容易處理，病毒汙染對操作者威脅較大；盡管病毒汙染的細胞不影響原代培養(yang) ，但生產(chan) 疫苗是不安全的。潛在的病毒汙染是細胞大量生產(chan) 和疫苗、幹擾素等生物製品製作中的難題。

真菌（黴菌和酵母菌）：真菌汙染後培養(yang) 液不變渾濁，不象細菌汙染那麽(me) 容易被發現，真菌汙染是細胞培養(yang) 中zui常見的一種汙染；汙染後細胞生長的比較慢，目前沒有好的抑製方法，包括現在常用的兩(liang) 性黴素，一旦汙染容易反複爆發，尤其孢子很難殺滅。

支原體(ti) ：支原體(ti) 汙染細胞後，不會(hui) 使細胞死亡且可以與(yu) 細胞長期共存，培養(yang) 基一般不發生渾濁，多數情況下細胞病理變化輕微或不顯著，細微變化也可由於(yu) 傳(chuan) 代、換液而緩解，外觀上給人以正常感覺，往往被大多數實驗者忽視，實則細胞已經受到多方麵潛在影響，如引起細胞變形，影響DNA合成，抑製細胞生長等。非同種細胞：即細胞交叉汙染，由於(yu) 細胞培養(yang) 操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴(yan) 格分開，往往會(hui) 使一種細胞被另一種細胞汙染。目前，世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所汙染，致使許多實驗宣告無效。