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PCR儀的分類原則

更新時間:2016-04-25瀏覽:1832次

  簡單的說,PCR儀(yi) 就是利用DNA聚合酶對特定基因做體(ti) 外或試管內(nei) In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專(zhuan) 一性的連鎖複製。目前常用的技術,可以將一段基因複製為(wei) 原來的一百億(yi) 至一千億(yi) 倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀(yi) 分為(wei) 普通PCR儀(yi) ,梯度PCR儀(yi) ,原位PCR儀(yi) ,實時熒光定量PCR儀(yi) 四類。
  普通的PCR儀(yi) :
  把一次PCR擴增隻能運行一個(ge) 特定退火溫度的PCR儀(yi) ,叫傳(chuan) 統的PCR儀(yi) ,也叫普通PCR儀(yi) 。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是做簡單的,對目的基因退火溫度的擴增。該儀(yi) 器主要應用於(yu) 科研研究,教學,醫學臨(lin) 床,檢驗檢疫等機構。
  梯度PCR儀(yi) :
  把一次性PCR擴增可以設置一係列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常有12種溫度梯度,這樣的儀(yi) 器就叫梯度PCR儀(yi) 。因為(wei) 被擴增的不同DNA片段,其zui適退火溫度是不同的,通過設置一係列的梯度退火溫度進行擴增,從(cong) 而一次性PCR擴增,就可以篩選出表達量高的zui適退火溫度,進行有效的擴增。主要用於(yu) 研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣節約成本的同時也節約了時間。主要用於(yu) 科研,教學機構。梯度PCR儀(yi) ,在不設置梯度的情況下也可以做普通PCR擴增。具有雙槽梯度的不多,領成具備此功能。
  原位PCR儀(yi) :
  用於(yu) 從(cong) 細胞內(nei) 靶DNA的定位分析的細胞內(nei) 基因擴增儀(yi) ,如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內(nei) 的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性,使PCR反應體(ti) 係滲透到組織和細胞中,在細胞的靶DNA所在的位置上進行基因擴增,不但可以檢測到靶DNA,又能標出靶序列在細胞內(nei) 的位置,於(yu) 分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和臨(lin) 床過程及病理的轉變有重大的實用價(jia) 值。
  實時熒光定量PCR儀(yi) :
  在普通PCR儀(yi) 的基礎上增加一個(ge) 熒光信號采集係統和計算機分析處理係統,就成了熒光定量PCR儀(yi) 。其PCR擴增原理和普通PCR儀(yi) 擴增原理相同,隻是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與(yu) 模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集係統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理係統得出量化的實時結果輸出。把這PCR儀(yi) 叫做實時熒光定量PCR儀(yi) (qPCR儀(yi) )。熒光定量PCR儀(yi) 有單通道,雙通道,和多通道。當隻用一種熒光探針標記的時候,選用單通道,有多熒光標記的時候用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記的目的基因表達產(chan) 物,因為(wei) 一次隻能檢測一種目的基因的擴增量,需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量。該儀(yi) 器主要用於(yu) 醫學臨(lin) 床檢測,生物醫藥研發,食品行業(ye) ,科研院校等機構。

 

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