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凝膠成像係統的應用範圍

更新時間:2016-06-06瀏覽:1417次

  凝膠成像係統即對DNA/RNA/蛋白質等凝膠電泳不同染色(如eb、考馬氏亮藍、銀染、sybr green)及微孔板、平皿等非化學發光成像檢測分析。凝膠成像係統可以應用於(yu) 分子量計算,密度掃描,密度定量, PCR定量等生物工程常規研究。
  總體(ti) 上來說凝膠成像可應用於(yu) :凝膠成像係統可以用於(yu) :蛋白質、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結果作定性分析。
  (1)分子量定量
  對於(yu) 一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,並以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結果較肉眼觀察估計要準確很多。
  (2)密度定量
  一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它隻能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區分各個(ge) 長度片段的濃度。利用凝膠成像係統和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標準條帶進行密度標定以後,可以方便的單擊其他未知條帶,根據與(yu) 已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用於(yu) 對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。
  (3)密度掃描
  在分子生物學和生物工程研究中,zui常用到的是對蛋白表達產(chan) 物占整個(ge) 菌體(ti) 蛋白的百分含量的計算。傳(chuan) 統的方法是利用的密度掃描,但利用生物分析軟件結合現在實驗室常規配備的掃描儀(yi) 或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項工作。
  (4)PCR定量
  PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴增出來的條帶不是一條,那麽(me) 可以利用軟件計算出各個(ge) 條帶占總體(ti) 條帶的相對百分數。就此功能而言,與(yu) 密度掃描類似,但實際在原理上並不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進行相對密度定量並計算其占總和的百分數,密度掃描時並對選擇區域生成縱向掃描曲線圖並積分。

 

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