羅氏熒光定量PCR儀LightCycler480詳細介紹

羅氏熒光定量PCR儀(yi) LightCycler480詳細介紹

一、適用範圍：臨(lin) 床/科研中利用熒光定量PCR方法檢測目標基因，對其進行定量或者定性分析或進行基因分型或檢測突變，為(wei) 臨(lin) 床治療進行指導。
二、熒光定量PCR儀(yi) LightCycler 480 II性能總結
作為(wei) 熒光定量技術的持有者，羅氏公司一直致力於(yu) 為(wei) 客戶提供性能優(you) 秀的定量產(chan) 品，羅氏LightCycler^® 480（以下簡稱LC-480）於(yu) 2005年底麵世，2006年開始在中國推廣，截至目前，已經在中國各研究及機構銷售達1000多台，市場反應熱烈！
    LC-480是在總結了目前市場上現有熒光定量的特點後，結合Roche自身的技術優(you) 勢研發出來，在以下幾個(ge) 方麵體(ti) 現了的技術特色：
1．反應容器及檢測通量： 
    96孔，可選配升級為(wei) 384孔反應模塊。用戶可自行更換，無需工程師到場。
 5色激發通道：290－800nm， 440，465，498，533，618nm； 6色熒光檢測通道： 488，510，588，610，640，660nm，適用多種熒光染料，開放性試劑，客戶可根據實際情況選擇ROCHE或其他廠家提供的試劑。
2．反應體(ti) 積： 
96孔板： 10-100μl， 384孔板： 3-20μl，可節省實驗成本。
3．溫控係統（標準模式 ）：     
樣本升溫：4.8℃/秒，連續可調
均一性： +/-0.1℃（是板式定量PCR中溫度均一性好的產(chan) 品）
準確性： +/-0.1℃
反應時間：不借助快速試劑，96孔＜60min，384孔＜­­40min
4．光學係統： 
4/1）采用白色固態光源，光強相對於(yu) 氙燈更強，波長範圍為(wei) 全波長，適用多種熒光染料，開放性試劑，客戶可跟據實際情況選擇ROCHE或其他廠家提供的試劑。
4/2）激發光經五角反射鏡減少光程差，消除光學邊緣效應。
4/3）熱蓋的設計減少孔間光學信號交叉，鄰近孔之間大交叉幹擾<0.02%。顏色補償(chang) 軟件及濾光片減少同一孔內(nei) 的多種熒光染料的信號幹擾，實現多重PCR方式。
5．線性範圍及檢測靈敏度：
定量動態範圍可達10⁰－10¹⁰，樣品無需稀釋，達到單拷貝基因的水平。
6．精確性及重複性：
孔間檢測的重複性為(wei) CV≤0.15%。可以區分1000與(yu) 2000拷貝的差異，而且此項會(hui) 作為(wei) 裝機指標！
7．檢測模式:
熒光染料（SYBR Green等）、Taqman 探針、分子信標、 Scorpion，雜交探針、單探針等
8．軟件係統革新：
8/1）*的大二階導數法取Ct值。
8/2）考慮PCR實際擴增效率，而非武斷設定為(wei) 2
8/3）含效率校正的相對定量軟件
8/4）高分辨率熔解曲線分析進行基因掃描等

 羅氏熒光定量PCR儀(yi) LightCycler480詳細介紹 特色功能：

1.HRM分析功能：
高分辨率熔解曲線 （High Resolution Melting, HRM）可以從(cong) 更細致的程度研究雙鏈DNA的熱變性過程，從(cong) 而獲取更多的信息量。HRM做為(wei) 一種創新、均一、PCR擴增反應後進行的分析方法，可應用於(yu) 對PCR擴增產(chan) 物中SNP，基因突變和甲基化等基因變異檢測等廣泛的研究分析領域,如對食品中病源微生物的快速篩查與(yu) 檢測等。
  憑借LightCycler® 480II係統*的基因掃描軟件和配套提供的高分辨率熔解曲線PCR反應即用型體(ti) 係HRM PCR Master，羅氏診斷應用科學部*提供了基於(yu) 模塊式定量PCR儀(yi) 上的整合式基因掃描方案。
2. Universal Probe Library通用探針庫（＞5000000轉錄組）
隻需要165個(ge) 預製探針就完成上百萬(wan) 種實時定量PCR實驗，對整個(ge) 轉錄組進行高效研究。整套探針易於(yu) 冰箱存儲(chu) ，讓您的實時定量PCR檢測可靈活自在地進行。
UPL的165個(ge) 探針選自轉錄組中高頻率出現的8-和9-堿基序列，確保可以覆蓋任意的一個(ge) 轉錄組的全部轉錄子。
UPL探針僅(jin) 8到9個(ge) 核苷酸長，且含有Locked Nucleic Acids(LNA)。LNA是一類核糖2、4位羥基縮合形成氧橋的核酸類似物，這一特殊構像的核糖能夠促進堿基堆積及核糖預組織效應從(cong) 而提高其熱穩定性，使僅(jin) 不到10個(ge) 核苷酸長度的探針Tm值有顯著的提高，方便進行水解探針法的定量檢測。並且，含有LNA的UPL探針能夠辨別其他核酸探針無法區分的單堿基錯配，從(cong) 而輕鬆保證您基因表達檢測的專(zhuan) 一性要求。
3. RealTime ready 預製檢測板
這一係列的預製探針組合是用於(yu) 多種qPCR檢測的即用預製微孔板，可直接用於(yu) 檢測大量特定信號通路、代謝途徑或特定功能相關(guan) 的基因表達情況。為(wei) 方便使用，已預裝於(yu) LightCycler® 96-/384-孔板中，每一平板都含有目標特異的引物以及Universal Probe Library探針。您所需添加的隻有預混酶液、水以及樣本cDNA，就可以獲得類似於(yu) 微流體(ti) 芯片的分析功能，整個(ge) 過程更加直觀、簡便。如果您有已知需要檢測的基因，羅氏還支持為(wei) 您在線定製專(zhuan) 屬的預製檢測板，大化地節省您寶貴的時間。
除了信號通路、代謝途徑或特定功能相關(guan) 的目標基因，每一預製平板上也包含了逆轉錄產(chan) 物特異的對照以及內(nei) 參基因用於(yu) 簡化分析實驗數據。